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果胶裂解酶酶活测定方法

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果胶裂解酶是果胶酶的一种,它催化果胶分子链进行裂解,在食品工业生产中可以提高果汁的产量。检测果胶裂解酶含量,原理就是以聚半乳糖醛酸为底物,果胶被水解并3,5-二硝基水杨酸试剂(DNS)发生显色反应,在波长nm的地方测定反应物吸光值的增加。采用分光光度法测定的灵敏度高,重现性好。

检测材料:水果

设备仪器:离心机、移液器、离心管、分光光度计、具塞刻度试管、水浴锅、容量瓶等。

检测试剂:50mmol/L、pH5.5醋酸钠缓冲液、提取缓冲液、1%多聚半乳糖醛酸溶液、3,5-二硝基水杨酸(DNS)试剂、1mg/mL葡萄糖标准液

检测过程:制作标准曲线-果胶裂解酶液制备-活性测定-结果并计算。

注意事项:

1.酶解反应的过程中,温度和时间必须严格把握。

2.测定各管中溶液的吸光度值,重复三次。

2.根据样品反应管和对照管溶液吸光度值的差值,从标准曲线上查得相应葡萄糖毫克数。




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