果胶酶活性检测试剂盒（货号：AKSU）
果胶酶（Pectinase）是一种能够分解果胶质的复合酶，广泛存在于植物果实和微生物中，主要分为原果胶酶、果胶裂解酶、果胶酯酶和聚半乳糖醛酸酶，其催化作用是多种酶协同作用的结果。果胶酶可以作为食品加工领域的澄清剂，同时在饲料加工、纺织和造纸等领域具有广泛应用。
果胶酶能够水解果胶生成半乳糖醛酸，半乳糖醛酸能够与DNS试剂反应生成棕红色物质，产物在nm处具有特征吸收峰，通过吸光值的变化即可表征果胶酶的活性。
果胶酶活性检测原理测定过程中所需要的仪器和试剂：可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、可调式移液器、台式离心机、恒温水浴和蒸馏水。
1.粗酶液的制备（可根据预实验结果适当调整样本量及比例）
①细菌或细胞：离心收集细菌或细胞至离心管内，按照细菌或细胞数量（10个）：提取液体积（mL）为（-）:1的比例（建议万细菌或细胞加入1mL提取液）处理样品，冰浴超声破碎（功率W，超声3s，间隔7s，总时间3min），4℃0g离心10min，取上清置于冰上待测。
②组织：按照组织质量（g）：提取液体积（mL）为1：（5-10）的比例（建议称取0.1g组织，加入1mL提取液）处理样品，冰浴匀浆，4℃0g离心10min，取上清置于冰上待测。
③液体样品：直接检测或适当稀释后再进行测定。
2.测定步骤
①分光光度计预热30min以上，调节波长至nm，蒸馏水调零。
②灭活粗酶液的制备：取适量粗酶液沸水浴处理10min（密封以防止水分散失），冷却至室温即为灭活粗酶液。
吸光值测定：测定nm处吸光值，记为A测定、A对照、A标准和A空白；计算A测定=A测定-A对照，A标准=A标准-A空白。注：空白管只需测定1-2次，每个样品均需设一个对照管。
标准曲线的建立：以6.0、5.0、4.0、3.0、2.0、1.0mol/mL为横坐标（x），对应ΔA标准为纵坐标（y）绘制标准曲线，得到线性回归方程y=kx+b，将ΔA测定代入方程得到x（mol/mL）。
注意事项
①若测定吸光值超出标准吸光值线性范围：高于最高值建议将上清液或粗酶液适当稀释后再进行测定；低于最低值建议适当增加样本量后再进行测定，计算时相应修改；
②为保证结果准确且避免试剂损失，测定前请仔细阅读说明书（以实际收到说明书内容为准），确认试剂储存和准备是否充分，操作步骤是否清楚，且务必取2-3个预期差异较大的样本进行预测定，过程中问题请您及时与工作人员联系。
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